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第一章 绪论
卫生微生物学是一门什么学科? 能解决什么问题? 怎样解决这些问题?
卫生微生物学:微生物与其环境相互作用的规律、对人类健康的影响以及应对方略的科学。
卫生微生物学与医学微生物学的区别:
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卫生微生物学 |
医学微生物学 |
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研究目的 |
以预防为主,保护群体健康 |
治疗个体病人,维护个体健康 |
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研究内容 |
研究微生物与外界环境之间相互关系 |
研究致病性微生物与机体之间的关系 |
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研究对象 |
包括致病性微生物和非致病性微生物 |
致病性微生物 |
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研究方法 |
定性、定量 |
定性 |
实验卫生微生物时期:
1. 17世纪荷兰人吕文虎克(A.V.Leeuwenhoek)从自制显微镜中首次观察到微生物在雨水、井水海水等环境中的存在
2.19世纪德国学者施旺(T.Schwann)首次报道了空气中微生物可污染食品,并造成食品的腐败与变质
3.法国科学家巴斯德(Pasteur,1822—1895) 酒类酿造、酒类变质原因,发明巴氏消毒法
4.英国外科医生李斯特(J.Lister,1827—1912)研究认为开放性伤口感染是由空气中微生物引起的。根据这一设想,创用了石炭酸喷洒手术室,病人的皮肤、医生的手、使用的器械均用稀释石炭酸液消毒,以防止外科手术后的继发感染,为外科消毒技术奠定了基础。
5.医学细菌学奠基人德国医生科赫(R.Koch)创用固体培养基于1876年从病死畜的血液和组织中发现并分离出炭疽杆菌
第二章 微生物生态
微生物生态学:研究微生物与其生存环境、微生物群体之间相互关系的科学,即微生物群体与周围环境的生物和非生物因素的相互关系的科学。
种群(population)是由相同的许多个体所组成,种群内的个体之间是一个有机的统一体。是物种具体的存在单位、繁殖单位和进化单位。
生境(habitat)指生物栖息的场所 。对微生物而言,生境通常为微小生境 。是指微生物生存的外环境。
演替:一定生境中,一个群落被另一个群落替换的过程。
一、微生物与环境之间相互作用的基本规律
1.利比西最低量法则:某种生物的总生物量是由环境中该生物生长所需的最低浓度营养决定的。如,水中的微生物的总量。
2.耐受性定律:指生物对环境中生态因子能耐受的范围。微生物对环境因子有一种限定要求,低于或高于这个要求,尽管有营养供给,微生物也不能存活和生长。例如:微生物对温度的耐受:嗜冷菌 兼性嗜冷菌 嗜温菌 嗜热菌 超嗜热菌
3.综合作用定律:一个生物或一群生物的生存和繁殖取决于综合环境。
二、微生物之间相互作用的基本生态规律
正面相互作用:
偏利共生:一种微生物能长生某种物质或改变环境促使另一种微生物生长,而对前者无影响。
互利共生:同一生境的两种微生物互换产物,相互依赖,共同有利,生活在生理上形成整体。(专性)
互惠共生:两个种群的共同生存可以相互受益,但不是一种固定的关系,解除关系后双方都能独立生存。(非专性)
负相互作用:捕食 寄生 拮抗 竞争
微生物生态的基本规律小结
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营养因子 数量限制
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耐受力 是否生存 一定生境中微生物的种类和种类的变化
微生物之间的相互作用
例如:牛奶变质过程的微生物生态(即微生物种类与种类的变化)
第四章 卫生微生物研究和检测的
卫生微生物检测的特点
检测对象:致病、非致病、条件致病微生物
标本来源:人体、环境
环境中致病微生物数量少,需要特异的检测方法,并且多依靠指示微生物
样品的采集原则
(一)样品必须要有代表性:
ü 采样量:满足检测要求
ü 采样部位:均匀采样
ü 采样时间:便于分析微生物的动态变化
ü 采样批号:尽量检测每个批号
(二) 避免对样品的污染:器材灭菌、无菌操作
(三)避免对样品中微生物的杀灭和抑制:避免有毒物质的残留和高温影响
(四)对样品进行详细的标记:这是基本要求
样品的运送原则
(一)尽快送检:一般3-4h内送检,减少细菌死亡和进一步繁殖带来的影响。
(二)注意保护待检的微生物:一定的温度,加保护剂,运送培养基,如病毒、厌氧菌等
(三)高致病微生物的完善包装
(四)进行完善的样品交接:必须有样品送检单,与实验室人员逐项核对后交接
实验室检验原则
(一)具有相应的实验室硬件设施:
ü 1级(P4实验室):可检验危害性最严重的病原体,如天花病毒、HIV、SARS病毒等。
ü 2级(P3实验室):可检验特殊危险致病菌,如霍乱菌。
ü 3级(P2实验室):检验一般致病菌。
ü 4级(P1实验室):检验非致病菌。
(二)具有合格的人员和采用标准或公认的检验方法
ü 人员要有资质,并经常接受培训
ü 采用国家标准方法或公认方法(WHO、EPA等)
(三)加强实验室质量控制
ü 仪器、设备、试剂:定期检定和校准
ü 注意记录和核查:如GLP(标准实验室规范)实验室
ü 报告规范:数据规范,完整签名盖章
(四)实验室应有应急措施
ü 应对突发事件能力
ü 需做多种检验时,微生物优先
ü 恰当的样品处理与检验
指示微生物(indicator microorganism):在常规卫生监测中,用以反映检品卫生状况及安全性的(非致病)指示性微生物。
设定指示微生物的原因:微生物(包括致病和非致病的)种类繁多,不可能一一检测;环境中致病微生物往往数量少,检测困难,需要用相对易于检测的微生物来间接反映
指示微生物的选择总的原则:检测简便,相关性好
粪便污染指示菌的选择
l 检测简便:易检出,易定量计数。
l 相关性好:与粪便污染的相关性好;与肠道致病菌的相关性好。
指示微生物的种类:
(1)反映微生物综合污染:细菌、霉菌和酵母菌落总数
(2)反映微生物污染来源:粪便污染指示菌(大肠菌群、粪大肠菌群);空气污染指示菌(溶血性链球菌
(3)不得检出的致病微生物
(4)间接反映致病微生物:如反映肠道病毒的噬菌体等
(5)消毒效果指示菌:嗜热脂肪芽孢杆菌(压力蒸汽灭菌);短小芽孢杆菌(电离辐射灭菌);枯草杆菌黑色变种芽孢(环氧乙烷灭菌)
常用的指示微生物
(一)菌落总数
1、概念:单位量的被检样品 (g、ml、cm2、m3)内,所含有的能在某种培养基上经一定条件培养后生成的菌落数量。
种类:细菌菌落总数(不能说细菌总数) 、霉菌和酵母菌菌落总数。
报告: cfu/每单位样品量,如: cfu/ g、 cfu/ ml。(cfu :colony forming unit)
2、菌落总数的卫生意义
菌落总数是判定检样被微生物污染程度的指示菌,是某些样品的卫生限量标准。
3、菌落总数的测定方法类型:标准平板计数法、表面涂布法
(二)粪便污染指示菌
1.大肠菌群(coliform group)大肠菌群系指一群能在37℃、24h内发酵乳糖产酸产气,需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群检测:
l 35 ~37℃生长:培养于这个温度下
l 24h内发酵乳糖产酸产气:培养基中加乳糖,
24小时内观察是否产酸产气:气:培养基中有气泡;酸:培养基中加酸碱指示剂
l 需氧或兼性厌氧:一般孵箱可
l 革兰阴性无芽孢杆菌:革兰染色,光镜下观察
种类 :总大肠菌群 、耐热大肠菌群(粪大肠菌群 )
大肠菌群的卫生学意义:是常规检测的卫生指示菌,饮用水、生活用水、各类产品(食品、药品、化妆品等)都要进行检测,推断检样中有无被肠道致病菌污染的可能。
测定方法:多管发酵法、滤膜法、纸片法。
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